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森肽生物告知您ELISA实验小技巧

ELISA实验是一种酶联免疫吸附试验,具有高灵敏度、高特异性和良好的重复性。在进行ELISA实验时,掌握一些小技巧有助于提高实验的成功率和准确性。以下是一些建议:
1. 加样技巧:在加样时,吸取标本、标准品、酶结合物或底物时,尽量保持各孔加样时间间隔一致,避免因时间间隔过长导致的预孵育时间差异,从而影响测量值的准确性和重复性。可以使用多道移液器进行加样,以减少加样时间。
2. 孵育注意事项:为防止样品蒸发,将反应板放在铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。洗板后应尽快进行下一步操作,避免酶标板处于干燥状态。同时,严格遵守给定的孵育时间和温度。
3. 洗涤技巧:在洗涤过程中,使用滤纸充分拍干反应孔中的洗涤液,避免将滤纸直接放入反应孔中吸水。同时,要清除板底残留的液体和手指印,避免影响后续酶标仪读数。
4. 反应时间控制:加入底物后,定时观察反应孔的颜色变化(如每隔10分钟)。如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
5. 操作说明:封板膜只做一次性使用。当待测物质含量过高时,先将样本进行适当稀释。
6. 样本处理:在进行ELISA实验前,需对待测样本进行适当处理,如血液样本需进行离心、分离血清。不同类型的样本(如组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清等)处理方法也有所不同,需根据实际情况选择合适的处理方法。
通过以上小技巧,可以有效提高ELISA实验的准确性和成功率。在实验过程中,还需仔细阅读试剂盒说明书,并遵循厂家的建议和操作步骤。