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ELISA试剂盒适用样本类型及处理方法全解析

发表时间:2025-03-11

ELISA试剂盒适用样本类型及处理方法全解析

ELISA试剂盒作为实验室检测的“黄金标准”,可精准检测多种生物样本中的目标蛋白、抗体或抗原。无论是基础研究还是临床诊断,样本的正确选择与处理都是实验成功的关键!以下是常见样本类型及处理方法指南:


1. 血清样本

适用检测:抗体、细胞因子、激素(如胰岛素、皮质醇)等。
处理方法

  • 采集全血后室温静置30分钟至1小时,待血液凝固。
  • 4℃条件下以2000-3000×g离心15分钟,取上层黄色透明液体即为血清。
  • 分装后-80℃保存,避免反复冻融。

2. 血浆样本

适用检测:凝血因子、炎症标志物(如CRP)。
处理方法

  • 使用抗凝管(EDTA/肝素/柠檬酸钠)采集全血,轻柔混匀。
  • 4℃条件下以1000-2000×g离心10分钟,取上层血浆。
  • 注意:不同抗凝剂可能影响检测结果,需参照试剂盒说明选择。

3. 细胞培养上清

适用检测:分泌型蛋白(如细胞因子IL-6、TNF-α)。
处理方法

  • 收集培养液,1200×g离心5分钟去除细胞碎片。
  • 若样本中蛋白浓度过低,可适当浓缩后检测。
  • 添加蛋白酶抑制剂(如PMSF)防止降解。

4. 组织匀浆

适用检测:组织内蛋白表达(如肿瘤标志物)。
处理方法

  • 称取适量组织,按比例加入裂解液(如RIPA)冰上匀浆。
  • 12000×g离心20分钟,取上清液检测。
  • 建议测定总蛋白浓度以标准化数据。

5. 尿液/其他体液

适用检测:代谢产物(如尿微量白蛋白)、病原体抗原。
处理方法

  • 尿液需离心去除沉淀,调节pH至中性后检测。
  • 脑脊液、唾液等需根据粘度适当稀释。

注意事项
? 所有样本建议分装保存,避免反复冻融。
? 检测前需平衡至室温,减少孔间温差。
? 高脂血症或溶血样本可能干扰结果,需预处理。


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